在保證一定分離效果的前提下,快速分析是色譜技術的重要發展方向。
色譜柱管的設計和使用條件優化可以縮短分析時間,提高分析效率,例如采用更小粒度的填料、優化流動相流速等。
色譜柱管的使用與維護:
1.安裝與連接:安裝時需確保柱管與接頭的密封良好,避免泄漏。連接方式應正確無誤,以保證流動相能夠順利通過色譜柱,同時減少柱外死體積,防止對分離效果產生不良影響。
2.流動相選擇:根據樣品性質和色譜柱類型選擇合適的流動相,流動相的組成、pH值等因素都會影響分離效果和色譜柱的使用壽命。例如,在使用反相色譜柱時,通常采用甲醇、乙腈等有機溶劑與水組成的混合流動相。
3.樣品前處理:樣品中的雜質可能會污染色譜柱,降低柱效和使用壽命,因此在進樣前需對樣品進行適當的預處理,如過濾、萃取、濃縮等,以去除懸浮物、大分子雜質等。
4.日常維護:使用完畢后,應及時清洗色譜柱,防止殘留樣品在柱內積累。長期不用時,需按照色譜柱的保存要求進行妥善保存,如用適當的溶劑沖洗后密封保存,避免柱內干燥或受潮。
色譜柱管的測定步驟:
1.安裝前檢查:檢查氣體過濾器、載氣、進樣墊和襯管等,保證輔助氣和檢測器的通氣暢通。若之前做過較臟樣品或活性較高的化合物,需將進樣口的襯管清洗或更換。
2.安裝色譜柱:將螺母和密封墊裝在色譜柱上,并小心地將色譜柱兩端切平,確保切面平滑整齊。然后將色譜柱連接于進樣口上,注意插入深度要合適,通常入口應保持在進樣口的中下部,即處于進樣針穿過隔墊插入進樣口后針尖與色譜柱入口相距1~2cm,具體可參考GC儀器的隨機手冊。避免用力彎曲擠壓毛細管柱,防止其斷裂受損。
3.設置條件:根據分析需求,設置色譜儀的相關參數,如溫度、壓力、流速等。一般先設置較低的流速,以保護色譜柱,并逐漸調整至合適的流速。
4.進行測試:注入樣品,啟動色譜儀,使樣品在色譜柱中進行分離。觀察色譜峰的形態、保留時間、峰寬等參數,以評估色譜柱的性能。
5.數據處理與分析:記錄色譜峰的相關數據,如峰面積、峰高、保留時間等,并根據這些數據計算色譜柱的柱效、選擇性、分離度等指標,從而評價色譜柱的性能。